Экстракты плодового тела Antrodia camphorate ингибируют клеточную пролиферацию и индуцируют апоптоз в клетках рака поджелудочной железы

Йи-Ван Чжэнь

Antrodia camphorate является грибом, произрастающим в Тайване, плодовое тело которого растет очень медленно. Красный камфорный гриб  является одним из самых ценных лекарственных грибов.

Плодовое тело Antrodia camphorate, как полагают, является эффективным при поносе, боле в животе, гипертензии и в качестве средства противоопухолевой терапии.

Целью данного исследования является изучение антипролиферативного эффекта экстракта камфорного гриба (ACE) в отношении клеток BxPC-3 рака поджелудочной железы человека в условиях in vitro и возможное влияние на механизм апоптоза.

Из плодового тела A. camphorate было получено три экстракта (WE, EE и EA-E). Результаты   исследования показали, что АСЕ содержат тритерпеноиды, полисахариды и 1,3-β-D-глюкан, три основных эффективных компонента, которые, как сообщалось, проявляют биологическую активность, среди которых EA-E, по данным ВЭЖХ-анализа, обладает более высоким содержанием тритерпеноидов, тогда как WE и EA обладают более высоким содержанием полисахаридов, как показал спектрофотометрический анализ (WE, 399,11 ± 0,01 мг / г; ЕЕ, 207,69 ± 0,01 мг / г; EA-E, 140,64 ± 0,03 мг / г) и 1,3-β-D –глюкана, что было выявлено также в результате спектрофлоуметрического анализа (WE, 183,52 ± 0,29 мг / г; ЕЕ, 84,01 ± 0,36 мг / г; EA-Е, 81,37 ± 0,48 мг / г). Все фракции (WE, EE и EA-E), выделенные из ACE, проявляли явные цитотоксические свойства в отношении BxPC-3 клеток в течение 48 ч со значениями IC50, равными 39,83 ± 1,36 мкг/мл, 2,49 ± 0,10 мкг / мл и 2,36 ± 0,20 мкг / мл, соответственно.

Результаты проточной цитометрии показали, что ACE индуцировал суб-G1 пик гистограммы обработанных клеток, что указывало на наличие апоптоза в механизме токсичности экстракта гриба. Кроме того, при лечении BxPC-3 клетками в течение 48 ч, апоптотический эффект ACE был подтвержден двойным окрашиванием при помощи аннексина V-FITC/PI и последующей фрагментацией ядерной ДНК.

Аналогично, было показано, что в BxPC-3 клетках, обработанных ACE, были обнаружены очевидные признаки апоптоза, которые включали в себя конденсацию хроматина, округление клеток, появление отдельных мелких гранул и образование апоптотических тел.

С помощью анализа заживления ран выяснилось, что ACE значительно подавлял миграционную способность BxPC-3 клеток в зависимости от времени и данный ингибирующий эффект был еще более выраженным, чем у гемцитабина, клинического препарата, который в настоящее время используется в терапии рака поджелудочной железы.

Более того, вестерн-блоттинг анализ с обработанными клетками показал, что АСЕ-индуцированный апоптоз в BxPC-3 клетках может происходить посредством митохондрий-зависимого пути на фоне соответствующего баланса bax/bcl-2, повышая цитоплазматический уровень цитохрома С и активацию каспазы- 9, каспазы-3 и PARP.

В заключение, мы показали, что экстракт плодового тела Красного камфорного гриба оказывают анти-пролиферационное и проапоптотическое воздействие на клетки BxPC -3, что указывает на тот факт, что ACE играет роль в противоопухолевой терапии рака поджелудочной железы. Вполне возможно, что A. camphorate может служить в качестве естественного соединения, применяемого для профилактики и лечения рака поджелудочной железы.